ДЕКАЛЬЦИНАЦИЯ
Спасибо нашим инвесторам из казино онлайн
ДЕКАЛЬЦИНАЦИЯ
(от лат. de — отриц. част, и calx—известь), удаление извести. В гистологической технике для того, чтобы сделать органы или ткани, содержащие известковые соли, пригодными для резки на микротоме, следует предварительно извлечь из них известь путем обработки вырезанных (или выпиленных) кусочков особыми декальцинирующими смесями, содержащими те или иные к-ты. При декальцинации соблюдаются следующие правила: 1. Кусочки перед Д. должны быть предварительно фиксированы (напр. в формалине, спирте и пр.). Этого можно не делать только в том случае, если декальцинирующая смесь содержит фиксирующие вещества. После фиксации кусочки должны быть хорошо промыты в воде. 2. Кусочки должны быть по возможности небольшими, т. к. в противном случае проникновение жидкости к центральным частям кусочка будет происходить слишком медленно и от длительного действия к-ты могут быть повреждены периферические его части. Следует, наоборот, брать возможно большее количество декальцинирующей жидкости и часто ее взбалтывать. 3. Кусочки должны быть предварительно обезжирены путем проведения их через спирты восходящей крепости, иначе могут образоваться кристаллы жирных к-т, портящие препарат. 4. Кусочки подвергаются Д. столько времени, сколько требуется для полного удаления извести. Если они перележат, то может измениться структура и окрашиваемость тканей в связи с длительным воздействием к-т; поэтому надо возможно чаще пробовать путем укола иглой или надреза ножом, удалена ли известь или нет. Малейшие препятствия или хруст указывают на то, что Д. не закончена. 5. По окончании Д. кусочки должны быть основательно промыты в воде для удаления к-ты. Еще лучше после промывки в воде нейтрализовать к-ту путем оставления кусочков на сутки в 5%-ном растворе обыкновенных калийных квасцов [ALK^SO^-^ttjO] или в 5%-ном растворе сернокислого лития, после чего снова промыть в текучей воде в течение 24 часов. 6. После промывки кусочки могут быть нарезаны на замораживающем микротоме или залиты в целлоидин или парафин (предпочтительнее целлоидин). Если после заливки в целлоидин обнаружится, что известь не вся удалена, то декальцинацию можно произвести на залитых кусочках. 7. Перед окраской срезы рекомендуется провести через насыщенный водный раствор углекислого лития или через подщелоченный аммиаком спирт. В качестве декальцинирующих жидкостей употребляются растворы азотной, серной, сернистой, трихлоруксус-ной, соляной, муравьиной и др. к-т. Наиболее распространены следующие жидкости.— 1. Азотная к-та применяется в зависимости от плотности объекта в 2—10%-ном водном растворе. Следует помнить, что процент рассчитывается не на объем, а на вес. По русской фармакопее Acidum nitricum purum (уд. в. 1,200) содержит чистой азотной к-ты 32,5%; стало быть для получения 5%-ного раствора следует взять 15,5
см3
к-ты и добавить 84,5
см3
воды. В Германии имеется азотная к-та уд. в. 1,414, т. е. содержащая 68% чистой к-ты по весу. Иногда к водному раствору прибавляют вещества, задерживающие набухание тканей, как-то: квасцы, формалин или спирт. Смесь с квасцами приготовляется следующим образом: берут наполовину. разбавленный насыщенный (5 %-ный) раствор Квасцов и приготовляют 2—10%-ный раствор азотной к-ты. Для формалиновой смеси берут 10 %-ный раствор формалина и приготовляют 5—10 %-ный раствор азотной к-ты. Из спиртовых растворов наиболее употребительны жидкость Тома (Thoma): 5 частей 96%-ного спирта и 1 часть азотной к-ты и жидкость Гауга (Haug): чистая азотная к-та (уд. в. 1,200)—30—90
см3,
чистый спирт (96°)—725
см3,
дестилирован-ная вода—
300 см3,
хлористый натр—2,5 з.— 2. Сернистая кислота (ас. sulfuro-sum) употребляется в виде насыщенного водного раствора (обычный продажный препарат), который содержит около 5% кислоты. Предварительно можно фиксировать в 5—10%-ном формалине, но не обязательно, так как сернистая кислота сама действует как фиксатор. Действие быстрое, набухание слабое, к тому же при промывке уменьшается. По простоте обращения, надежности действия, доступности, дешевизне и слабому набуханию препарат сернистой к-ты—одно из лучших декальцинирующих средств.—3. Соляная к-т а вызывает значительное набухание и сильнее изменяет структуру тканей, особенно ядер. Обычно применяют 3—10%-ный водный или стартовый раствор, т. е. 12—40
см3
на 100 частей смеси. Наиболее употребительна смесь Эбне-ра (ЕЬпег). Насыщенный на холоду водный раствор поваренной соли—100
см3,
дестили-рованной воды-—100
см3,
чистой соляной кислоты—4
см3.
Во время Д. в этот раствор ежедневно подбавлять 1—2
см3
соляной
кислоты.—4. Из органических к-т наиболее употребительна муравьиная к-та. Она вызывает значительное набухание тканей, но не вредит окраске. Применять ее следует при Д. плотных костей и зубов. Употребляют ее в 20—25 %-ном растворе или даже (при Д. зубов) в чистом виде. Т. к. последующая промывка в воде еще более влияет на разбухание тканей, то лучше после Д. прямо переносить кусочки в спирт, меняя его до тех пор, пока не исчезнет кислая реакция. Лучше применять муравьиную к-ту пополам с 10%-ным формалином. При комбинации с золочением дает хорошо окрашенные препараты, особенно пригодна в этой комбинации для зубов (дентин). Рецепт: 1%-ного раствора хлористого золота— 6 ч., чистой концентрированной муравьиной к-ты—3 ч.—5. Слабым декальцинирующим свойством обладают жидкость Мюллера, жидкость Флемминга и насыщенный раствор пикриновой к-ты. При применении этих жидкостей предварительной фиксации не требуется. Декальцинация длится несколько недель. Цилькенс (Zilkens) предложил для зубов и плотных костей следующую смесь: азотная кислота (25%)—18
см3,
формалин чи – стый (40%-ный формальдегид)—8
см3,
хлорал-гидрат (насыщенный водный раствор)—• 8
см3,
антиформин (20%)—10
см3,
дестилиро-ванная вода—120
см3,
поваренная соль—8
г.
Для губчатых костей и вообще для тканей с небольшим содержанием извести: азотная к-та (25 %)—15 еж3, формалин чистый—8
см3,
хлорал-гидрат (насыщенный водный раствор)—5
см3,
антиформин (20 %)—-5
см3,
дести-лированная вода—100 еж8, повар, соль—8
г.
Эта жидкость чрезвычайно быстро (1—2 дня) декальцинирует и прекрасно сохраняет в тканях способность окрашиваться.
Лит.:
Никифоров М., Микроскопическая техника, М., i92l; Zilkens К., Erne verbesserte Entkalkungsfliissigkeit fur mikroskopische Untersu-chungen, Zentralblatt
t.
allg. Path, und path. Anat., B. XXV, № 2, 1914. См. также лит. к статье
Гистологическая техника.
М. Алексеев.